使用無死體積接頭，手?jǐn)Q至“finger-tight”后，再用扳手?jǐn)Q1/4圈（避免過緊導(dǎo)致漏液或柱頭損壞）。

　　檢漏：以低流速（0.2 mL/min）運(yùn)行流動相，檢查接口是否漏液。

　　2. 色譜柱活化與平衡

　　新柱活化：

　　用 100%甲醇 沖洗：5倍柱體積（如250mm×4.6mm柱約需15mL）。

　　過渡至流動相：梯度切換至初始流動相比例（如甲醇:水=70:30）。

　　平衡：

　　以工作流速（如1.0 mL/min）沖洗至少10倍柱體積，直至基線穩(wěn)定（UV檢測器信號波動＜±1%）。

　　3. 樣品分析

　　進(jìn)樣前處理：

　　樣品需用流動相或弱溶劑溶解，避免使用強(qiáng)溶劑（如純甲醇）直接進(jìn)樣導(dǎo)致峰形畸變。

　　過濾（0.22μm濾膜）防止柱頭堵塞。

　　方法設(shè)置：

　　流速、柱溫、檢測波長需與分析方法匹配（如C18柱常用30~45℃）。

　　梯度洗脫程序需平穩(wěn)過渡，避免壓力驟變。

　　4. 關(guān)機(jī)與保存

　　短期停用（<48小時）：

　　沖洗后保存在 純甲醇 或 乙腈 中（避免水相滋生微生物）。

　　長期停用：

　　沖洗后密封保存，標(biāo)注保存溶劑。

　　三、日常維護(hù)與注意事項(xiàng)

　　1. 壓力監(jiān)控

　　正常壓力：新柱壓力應(yīng)接近系統(tǒng)基線壓力（如5~10 MPa）。

　　異常升高：

　　可能原因：柱頭篩板堵塞、填料塌陷、顆粒污染。

　　處理：反向沖洗（需確認(rèn)柱耐受性）或更換篩板。

　　2. 柱效檢查

　　測試標(biāo)準(zhǔn)品：如萘、甲苯（反相柱），計算理論塔板數(shù)（N≥2000/m為正常）。

　　峰形異常：拖尾（可能柱頭污染）或前沿（樣品溶劑過強(qiáng)）需優(yōu)化方法。

　　3. 清洗與再生

　　污染物類型 | 清洗方案

　　脂溶性：100%甲醇→異丙醇→正己烷（梯度過渡）。

　　蛋白質(zhì)：0.1% TFA水溶液→乙腈。

　　鹽析：先用高水相（如95%水）沖洗，再過渡至有機(jī)相。

　　四、常見問題與解決

　　問題可能原因解決方案

　　壓力過高篩板堵塞、填料塌陷反向沖洗或更換篩板

　　峰形拖尾柱頭污染、死體積大清洗柱頭或更換保護(hù)柱

　　保留時間漂移柱溫波動、流動相比例變化穩(wěn)定溫度、重新平衡色譜柱

　　基線噪音流動相污染、氣泡過濾流動相、脫氣

　　五、注意事項(xiàng)

　　避免機(jī)械震動：搬運(yùn)或安裝時輕拿輕放，防止填料床擾動。

　　pH范圍：硅膠基質(zhì)柱通常耐受pH 2-8（超出會溶解硅膠）。

　　保護(hù)柱建議：復(fù)雜樣品建議加裝保護(hù)柱（同類型填料），延長分析柱壽命。

　　六、保存與報廢

　　報廢標(biāo)準(zhǔn)：柱效下降＞30%、壓力持續(xù)異常或峰形無法恢復(fù)。

　　環(huán)保處理：按實(shí)驗(yàn)室危廢規(guī)范處置（含有機(jī)溶劑殘留）。

　　通過規(guī)范操作和定期維護(hù)，Kromasil色譜柱可保持高分離效能和長使用壽命。具體方法需結(jié)合實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化（參考廠家手冊，如 Kromasil Technical Guide）。